核酸蛋白检测仪的基本原理:核酸蛋白检测仪即通常意义的紫外可见光分光光度计。利用物质对200-800nm光谱区内的光具有选择性吸收的现象,根据物质对不同波长单色光的吸收程度进行定性和定量分析。理论依据:朗伯-比耳定律(略。
BIO-RAD SmartSpec plus具有以下特点;
z工作波长200-800 nm
z可用于DNA、RNA和寡核苷酸的定量测定
z可用Bradford, Lowry和BCA检测法进行蛋
z可监控细胞培养的生长状况
z可用于简易的动力学分析
z可用于波长扫描和峰检测
z测试结束时,打印显示使用者、日期和结果的报告
z可提供以下计算结果:显示核酸纯度的A260/A280比率定量分析(考虑稀释因子ug/ml样品浓度(寡核苷酸为pmol/ I寡核苷酸的摩尔消光系数和分子量
核酸蛋白检测仪操作方法:
打开电源,显示系统自检页面,如系统有错误则显示出错信息。
根据需要选择实验内容
A.DNA/RNA
z选择核酸类型
dsDNA, ssDNA或RNA:接受或者修改换算因子
DNA寡核苷酸或RNA寡核苷酸:输入摩尔消光系数和分子量。或者,选择系统自带方法计算摩尔消光系数和分子量。(附:只需输入序列、长度或组成,SmartSpec Plus 会以g/ ml和pmol/I为单位显示出样品浓度,并计算摩尔消光系数和分子量
z选择是否扣除背景。如果是,选择指定背景波长
B.蛋白质
z选择计算方法
Bradford:检测595 nm吸光度
Lowry:检测750 nm吸光度
BCA:检测562 nm吸光度
UV:检测260、280、 320 nm吸光度
其它:用户指定吸收波长
z选择制作标准曲线
新建一个标准曲线
使用原有标准曲线
无标准曲线。SmartSpec Plus系统不能将吸光度转换成浓度
C.波长扫描.
z设置扫描上限、下限。(系统工作波长范围200-800 nm .
z选择是否扣除背景。如果是,选择指定背景波长
z选择快速扫描或慢扫描
Z对于快速扫描,选择连续扫描次数
D.动力学分析
7选择需要收集的波长
z选择数据收集时间
z选择连续收集间隔
z选择是否扣除背景。如果是,选择指定背景波长
E.换算因子修改
z接受或者修改换算因子
z选择需要收集的波长数
z指定收集的波长
z选择是否扣除背景。如果是.选择指定背景波长
34输入稀释倍数(系统默认稀释倍数为1.0
34调零。将空白对照放入样品仓按Read Sample键读取数据。
34收集样品吸光度。将样品放入样品仓.按Read Sample键读取数据。重复本步骤直到所有样品吸光度收集完毕。
34样品吸光度及/或浓度能自动显示。按Abs键查看样品在别的波长的吸光度。DNA或RNA寡核苷酸浓度可用ug/ ml和pmole/ul表示。按Conc键在这两个单位间切换。当处在吸光度和浓度界面是,可按ENTER键返回Ready界面,或者放入下一个样品直接按Read Sample键。
4检测完上一一个样品,按向左箭头退出检测界面
34蛋白质检测,保存标准曲线并打印所有报告。
注意事项
z填写使用记录。
z使用完毕,做好使用后的复原、清洁工作。保持加样仓及周边环境清洁
z比色杯甩水时,应远离桌面及周边仪器,避免摔裂,摔碎比色杯。
z比色杯使用完毕,应使用双蒸水冲洗干净,再用吸水纸吸干外壁后放回盒中。
z使用完毕后,关闭仪器开关方可离开。
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